目前常用的感受態細胞制備方法有CaCl2和RbCl（KCl）法，RbCl（KCl）法制備的感受態細胞轉化效率較高，但CaCl2 法簡便易行，且其轉化效率完全可以滿足一般實驗的要求，制備出的感受態細胞暫時不用時，可加入占總體積15％的無菌甘油于-70℃保存（半年），因此 CaCl2法為使用更廣泛。

感受態細胞的操作方法：

1、DH5α感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手bo打EP管底輕輕混勻，冰中靜置25分鐘。

2、42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

3、向離心管中加入700 μl不含***的無菌培養基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。

4、5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應***的2YT或LB培養基上。

5、將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。

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