在大鼠ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反響的完結需求有一定的溫度和時刻，這一保溫進程稱為溫育，有人稱之為孵育，在大鼠ELISA試劑盒中似不恰當。

1、為什么ELISA反響總是需求一定時刻的溫育？

ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗結合的S機，只有*貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的進程，因而需經擴散才能到達反響的結尾。在這以后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。

2、溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。

37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的適宜溫度。在建立ELISA方法作反響動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經1～2小時，產品的生成可達高峰。為加快反響，可進步反響的溫度，有些實驗在43℃進行，但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更為完全，在放射免疫測定中多使反響在冰箱中過夜，以構成最多的沉淀。但因所需時刻太長，在大鼠ELISA試劑盒中一般不予選用。

大鼠ELISA試劑盒保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴，可將大鼠ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA板底應貼著水面，使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱，大鼠ELISA試劑盒應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性較好的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規則的溫度，T別是在氣溫較低的時候更應如此。

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