人神經內分泌前列腺癌細胞NCI-H660

　　平臺編號:zl-057074

　　規格:1×10?cells/T25培養瓶

　　種屬：人源細胞系/腎、膀胱、輸尿管、前列腺

　　價格：詢價

　　到貨周期：10-15個工作日

　　詳情描述

　　細胞介紹

　　該細胞來源于63歲成年高加索地區男性的前列腺癌細胞在淋巴結的轉移灶。

　　細胞特性

　　1）來源：前列腺癌，淋巴結轉移

　　2）形態：上皮細胞樣

　　3）含量：>1x106個/mL

　　4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

　　5）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

　　運輸和保存：使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T25培養瓶中培養，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

　　細胞用途：僅供科研使用。

　　細胞培養步驟

　　一．培養基及培養凍存條件準備：

　　準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022,添加0.005 mg/ml胰島素，0.01 mg/ml轉鐵蛋白，30nM亞硒酸鈉，10 nM氫化可的松，10 nM beta-雌二醇，2mM L-谷氨酰胺，5%優質胎牛血清。

　　二．培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

　　三．凍存液：90%完全培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

　　二．細胞處理：

　　1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

　　1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

　　3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

　　4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

　　3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

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