K562人慢性骨髓性白血病細胞系

　　平臺編號:zl-056979

　　規格:1×10?cells/T25培養瓶

　　細胞介紹

　　該細胞是由Lozzio從一名53歲的慢性髓細胞性白血病急變期的女性患者的胸水中分離建立的。該細胞曾被認為來源于粒系，處于高度未分化階段；Anderson等人作了細胞膜特性的研究后，認為該細胞是紅白血病細胞系。該細胞是對自然殺傷細胞高度敏感的體外靶標，故而被廣泛應用于這方面的研究。K562的原始細胞是一種具有多向分化潛能的造血系統的惡性腫瘤細胞，能自發分化為紅系、粒系和單核系的可辨識的祖細胞。該細胞表達CD7（25％）。

　　細胞特性

　　來源：人

　　形態：淋巴母細胞樣；圓形

　　含量：>1x10e6個/mL

　　污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

　　規格：T75瓶或者1mL凍存管包裝

　　運輸和保存：使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T75培養瓶中培養，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

　　細胞用途：僅供科研使用。

　　細胞培養步驟：

　　一、培養基及培養凍存條件準備：

　　1、培養液：RPMI1640+10%FBS

　　2、培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

　　3、凍存液：90%FBS+10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

　　二、細胞處理：

　　1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

　　2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

　　1）棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2）加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

　　3）按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

　　4）將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

　　3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml FBS后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

　　注意事項：

　　1.收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

　　2.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。