Polybrene（Hexadimethrine Bromide）聚凝胺（10mg/ml）
（基因轉(zhuǎn)染/病毒感染增強(qiáng)劑）
基本介紹：
Hexadimethrine Bromide，中文名海（地）美溴銨，CAS：28728-55-4，一種多聚陽(yáng)離子聚合物，海美溴銨能夠增強(qiáng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率，常常用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞的DNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。比如，可轉(zhuǎn)染低分子量質(zhì)粒DNA進(jìn)入細(xì)胞系（如CHO），這種細(xì)胞用其他方法如磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染相對(duì)比較難。也常用于逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染。作用原理可能在于能夠中和細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥和增強(qiáng)受體不依賴的病毒吸收，來(lái)增強(qiáng)病毒的感染效率。
基本特性：
1）CAS：28728-55-4
2）同義名：Hexadimethrine Bromide;1,5-Dimethyl-1,5-diazaundecamethylene polymethobromide;
3）純度：≥94%(titration)
4）濃度:10mg/ml in H2O，無(wú)菌
5）化學(xué)結(jié)構(gòu)：
常見篩選濃度：
Polybrene（聚凝胺）是海（地）美溴銨（Hexadimethrine Bromide）液體制品的商標(biāo)名，是一種非常有效的基因轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑。用于病毒介導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用濃度為8μg/ml，具體濃度依細(xì)胞類型會(huì)有差異，可參閱文獻(xiàn)或梯度實(shí)驗(yàn)摸索。
Polybrene用于轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑，已經(jīng)成為各大實(shí)驗(yàn)室和各種基因轉(zhuǎn)染服務(wù)機(jī)構(gòu)zui通用的方法之一，相比于硫酸魚精蛋白（Protamine sulfate，CAS：98001-69-5）和其他陽(yáng)離子的使用普遍率更高更廣泛。發(fā)表的文獻(xiàn)至少上萬(wàn)篇。
參考使用濃度【文獻(xiàn)來(lái)源】：
1）用表達(dá)H-rasV12或小鼠Trop2基因的慢病毒感染新鮮制備的小鼠皮膚角質(zhì)細(xì)胞（Keratinocytes），使用
含4μg/ml polybrene的培養(yǎng)基孵育48h。之后收集細(xì)胞。
文獻(xiàn)：Wang J,et al.Loss of Trop2 Promotes Carcinogenesis and Features of Epithelial to Mesenchymal Transition in Squamous Cell Carcinoma.Mol Cancer Res.2011 Dec;9(12):1686-95.
2）用ATF3 shRNA慢病毒顆粒感染6孔板培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞，加入含10μg/ml polybrene的培養(yǎng)基孵育
24h，polybrene用來(lái)增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。用嘌呤霉素（10μM）篩選陽(yáng)性轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞株。
文獻(xiàn)：Weng S,et al.Niclosamide induced cell apoptosis via upregulation of ATF3 and activation of PERK in Hepatocellular carcinoma cells.BMC Gastroenterol.2016 Feb 25;16:25.
3）用TLR10 shRNA慢病毒顆粒感染THP-1細(xì)胞，細(xì)胞先于polybrene（8μg/ml）混合后，將病毒加入細(xì)
胞，病毒感染復(fù)數(shù)（MOI）為10。24h之后更換不含polybrene的新鮮培養(yǎng)基。用嘌呤霉素（1μg/ml）篩選陽(yáng)性克隆株。
文獻(xiàn)：Le HV,et al.Stable Toll-Like Receptor 10 Knockdown in THP-1 Cells Reduces TLR-Ligand-Induced Proinflammatory Cytokine Expression.Int J Mol Sci.2016 Jun 1;17(6).
4）為提高腺病毒轉(zhuǎn)染效率和LacZ轉(zhuǎn)基因表達(dá)，使用6μg/ml Polybrene處理病毒載體后轉(zhuǎn)入BHK-21細(xì)胞（MOI為100），轉(zhuǎn)染率提高到95%，沒(méi)有用Polybrene處理的只有2.3%轉(zhuǎn)染率。
5）NPC細(xì)胞（50%confluence）用含5μg/ml Polybrene的NBF培養(yǎng)基，之后用ZNF804A shRNA慢病毒顆粒感染細(xì)胞；24h后，更換不含polybrene的NBF培養(yǎng)基。24-48h之后，加入嘌呤霉素（5μg/ml）篩選陽(yáng)性克隆株。
文獻(xiàn)：Chen J,et al.ZNF804A Transcriptional Networks in Differentiating Neurons Derived from Induced Pluripotent Stem Cells of Human Origin.PLoS One.2015 Apr 23;10(4):e0124597.
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
——Written/Edited by V.Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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Polybrene聚凝胺（病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑）
Polybrene聚凝胺（病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑）
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