產品名稱：MMQ小鼠垂體瘤細胞

　　細胞數量：1*10^6

　　培養基：F-12K+15%HS+2.5%FBS+1%P/S

　　細胞凍存：液氮凍存（凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO）

　　細胞運輸：干冰運輸（1ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

　　注意事項

　　凍存細胞接收后的處理：

　　1.干冰運輸，收到細胞后立即轉入-80℃冰箱短暫中轉或直接復蘇；

　　2.收到細胞后，若發現干冰已經完全揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。

　　復蘇細胞接收后的處理：

　　1.收到細胞后，請首先檢查培養瓶是否破損或漏液，培養液是否混濁，如有漏液及培養液混濁情況請立即拍照把圖片發給我們。

　　2.75%酒精消毒瓶身后放培養箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養基接種至新的培養瓶或培養皿中。

　　3.建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理。

　　4.如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題，出現的細胞問題將不提供免費重發服務。

　　細胞培養方法：

　　1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

　　①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

　　②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

　　③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

　　④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

　　⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

　　⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

　　2、細胞復蘇：

　　①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

　　②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

　　3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

　　①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

　　②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養基終止消化；

　　③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

　　④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

　　智立中特（武漢）生物科技有限公司主要致力于質粒微生物資源的保護、共享和持續利用，圍繞我國生命科學研究、生物技術創新和產業發展等重大需求，探索、發現、收集國內外的微生物資源，妥善長期保存管理；在保證生物安全和保護知識產權的前提下，為工農業生產、衛生健康、環境保護、科研教育提供質粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業技術服務。旗下質粒載體網是一款提供質粒載體展示及定制的專業型網站，由智立中特（武漢）生物科技有限公司聯合多家企業公司科研院校共同打造！主要展示了各種基因類型下的質粒載體！

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　　目前保存各類載體資源超過20000余種，質粒微生物約5000株，另外我們還代理國外微生物菌種資源，如addgene，安捷倫，thermo，atcc等。