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　　細胞名稱人輔助性T細胞Th17

　　產品規格T25培養瓶x1 1.5ml凍存管x2

　　細胞數量1x10^6 1x10^6

　　保存溫度37℃-198℃

　　運輸方式常溫保溫運輸干冰運輸

　　安全等級1

　　用途限制

　　僅供科研1類

　　培養體系DMEM高糖培養基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone）

　　培養溫度37℃

　　二氧化碳濃度5%

　　簡介人輔助性T細胞Th17細胞取自女性外周血，懸浮培養，形態偏圓。

　　注釋/

　　STR信息/

　　參考文獻Combination of gp130-targeting and TNF-targeting small molecules in alleviating arthritis through the down-regulation of Th17 differentiation and osteoclastogenesis.Park Yeon-Hwa;;Kim Hee Jung;;Lee Kyeong Biochemical and biophysical research communications 2020-02-19

　　驗收細胞注意事項

　　1、收到人輔助性T細胞Th17，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯系。

　　2、收到人輔助性T細胞Th17，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

　　3、收到人輔助性T細胞Th17后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以加到15％去培養。若細胞迏到80%左右，血清濃度還是在10％。

　　4、收到人輔助性T細胞Th17時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下5-10ML培養基繼續培養：超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

　　5、將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

　　6、24小時后，人輔助性T細胞Th17形態已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

　　7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37℃，5%CO2培養。

　　特別提醒：原瓶中培養基不宜繼續使用，請更換新鮮培養基培養。

　　注意事項:僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）